Cum funcționează secvențierea ADN-ului Sanger?
Cum funcționează secvențierea ADN-ului Sanger?

Video: Cum funcționează secvențierea ADN-ului Sanger?

Video: Cum funcționează secvențierea ADN-ului Sanger?
Video: How does a DNA sequencing machine work? 2024, Noiembrie
Anonim

Secvențierea Sanger are ca rezultat formarea de produse de extensie de diferite lungimi terminate cu dideoxinucleotide la capătul 3 '. Produsele de extensie sunt apoi separate prin electroforeză capilară sau CE. Moleculele sunt injectate de un curent electric într-un capilar lung de sticlă umplut cu un polimer gel.

În acest fel, ce este metoda Sanger de secvențiere a ADN-ului?

Secvențierea Sanger , cunoscută și sub denumirea de terminare a lanțului metodă , este o tehnică pentru Secvențierea ADN-ului bazat pe încorporarea selectivă a dideoxinucleotidelor cu terminare a lanțului (ddNTPs) de către ADN polimeraza în timpul in vitro ADN replicare. A fost dezvoltat de Frederick Sanger și colegii în 1977.

De asemenea, cum funcționează secvențierea de terminare a lanțului? ADN-ul Sanger secvențiere este cunoscut și sub numele de lanţ - rezilierea Metodă de secvențiere . ddNTP-urile au ca rezultat rezilierea a catenei ADN deoarece ddNTP-urilor nu au grupa 3'-OH necesară pentru formarea legăturii fosfodiesterice între nucleotide. Fără această legătură, lanţ de nucleotide care se formează este terminat.

Pur și simplu, de ce facem secvențierea Sanger?

Secvențierea Sanger este A metodă de Secvențierea ADN-ului bazată pe încorporarea selectivă a dideoxinucleotidelor care se termină lanțul de către ADN polimeraza în timpul in vitro ADN replicare. Are în continuare avantajul față de citirea scurtă secvențierea tehnologii (cum ar fi Illumina) că ea poate sa legume și fructe secvență de ADN citește > 500 de nucleotide.

Este corectă secvențierea Sanger?

Secvențierea Sanger cu 99,99% precizie este „standardul de aur” pentru cercetarea clinică secvențierea . Cu toate acestea, noile tehnologii NGS devin, de asemenea, obișnuite în laboratoarele de cercetare clinică datorită capacităților de transfer mai mari și a costurilor mai mici pe eșantion.

Recomandat: