De ce nu ar fi tăiat o enzimă de restricție?
De ce nu ar fi tăiat o enzimă de restricție?

Video: De ce nu ar fi tăiat o enzimă de restricție?

Video: De ce nu ar fi tăiat o enzimă de restricție?
Video: Ceaușescu deshumat 2024, Noiembrie
Anonim

Pot exista mai multe motive diferite pentru care dvs enzima de restricție nu se taie ADN-ul așa cum este analizat în acest videoclip. Pregătirea ADN-ului pentru a fi scindat ar trebui să să fie lipsit de contaminanți cum ar fi fenolul, cloroformul, alcoolul, EDTA, detergenții sau sărurile excesive, toate acestea putând interfera cu enzima de restrictie activitate.

În acest sens, de ce enzimele de restricție nu taie ADN-ul bacterian?

Bacterii avea enzime de restricție , numit si endonucleaze de restricție , care a tăia dublu catenar ADN în anumite puncte în fragmente. Interesant, enzime de restricție nu-și desprinde pe ale lor ADN . Bacterii preveni propriile lor ADN de la tăiat de enzima de restrictie prin metilarea restricţie site-uri.

Se poate întreba, de asemenea, unde se reduc enzimele de restricție? Enzima de restricție Tipuri în general, tip I enzimele tăiate ADN în locații îndepărtate de secvența de recunoaștere; Tipul II a tăia ADN în interiorul sau aproape de secvența de recunoaștere; Tipul III a tăia ADN aproape de secvențe de recunoaștere; și Tipul IV scindează ADN-ul metilat.

În mod similar, este întrebat, ce se întâmplă dacă adăugați prea multă enzimă de restricție?

Poate apărea digestia incompletă când prea mult sau de asemenea mic enzimă este folosit. The prezența contaminanților în cel Probă de ADN poate sa inhiba enzimele , rezultând și o digestie incompletă. niste enzime de restricție necesită cofactori pentru activitatea deplină.

De ce nu funcționează rezumatul meu de restricții?

Incomplet sau nu digestie datorită activității enzimatice blocate de metilarea ADN-ului. Dacă enzima dumneavoastră este activă şi digeră controlează ADN-ul și cel reacția este configurată folosind condiții optime, dar încă vedeți probleme cu digestie , ar putea fi pentru că cel enzima este inhibată prin metilarea cel ADN șablon.

Recomandat: